Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
(5)
(6)
где:
р - количество секций, на которые разделена хроматограмма;
уі - высота хроматографической линии над базовой линией для секции i;
Мі - молекулярная масса для секции i.
Результаты анализа считаются достоверными, если полученное значение Мw для 10% высокомолекулярной фракции декстрана находится в пределах:
- от 110000 до 130000 (для декстрана 40 для проверки пригодности ФСО);
- от 190000 до 230000 (для декстрана 60/70 для проверки пригодности ФСО).
Средняя молекулярная масса 10% низкомолекулярной фракции декстрана.
Значение М w для 10% низкокомолекулярной фракции декстрана, которая элюируется в секциях хроматограмм от секции р до секции m включительно, рассчитывают по формуле:
M С
S (y-Mi)
i=m__________
Р
S Уі
(7)
i=m
где:
m - номер секции, для которой выполняются неравенства:
(8)
p f p Л
S у-? 0,1 S у-
i=m V i=1 0
p f p ^ S у- > 0,1 S у
i = m -1
(9)
V i=1 0
где:
р - количество секций, на которые разделена хроматограмма;
уі - высота хроматографической линии над базовой линией для секции i;
Мі - молекулярная масса для секции i.
Результаты анализа считаются достоверными, если полученное значение Мw для 10% низкомолекулярной фракции декстрана находится в пределах:
- от 6000 до 8500 (для декстрана 40 для проверки пригодности ФСО);
- от 7000 до 11000 (для декстрана 60/70 для проверки пригодности ФСО).
# Параллельно с раствором проверки пригодности хроматографической системы хроматографируют также маркерный раствор.
# Для получения более надежных результатов в частных статьях рекомендуется регламентировать такие отношения сигнал/шум, степень разделения пиков декстрана 40 и глюкозы, эффективность пика глюкозы и близость расчета МС для повторных хроматограмм для проверки пригодности хроматографической системы.
МОЛЕКУЛЯРНО-МАССОВОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ АНАЛИЗИРУЕМОГО ДЕКСТРАНА
Хроматографируют выбранный объем испытуемого раствора и значение МС для молекулярно-массового распределения декстрана, значение Мw для 10% высокомолекулярной фракции декстрана и значение М w для 10% низкомолекулярной фракции декстрана, рассчитывают, как описано в разделе «Пригодность хроматографической системы».
# Параллельно с испытуемым раствором хроматографируют маркерный раствор.
# Полученные результаты молекулярно-массового распределения округляют до 10 значащих единиц.
# В настоящей документации к декстранам для градуировки ФСО и к декстрану для проверки пригодности ФСО приводятся паспортные значения средне массовой молекулярной массы Мw, значения молекулярной массы в максимуме пика, а также пределы для средней молекулярной массы, средней молекулярной массы для 10% высокомолекулярной фракции декстрана и средней молекулярной массы для 10% низкомолекулярной фракции декстрана.
2.2.40. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ БЛИЖНЕГО ИК-ДИАПАЗОНА
Спектрофотометрия ближнего ИК-диапазона - метод, который особенно полезен для идентификации органических веществ. Несмотря на то, что такие спектры ограничены поглощением связей C-H, N-H, O-H и S-H, они, обычно, имеют высокую информативность. Спектры зависят от различных параметров, таких как размер частиц, полиморфизм, остаточные растворители, влажность, которые не всегда могут быть учтены. По этой причине прямое сравнение спектра вещества и спектра образца сравнения обычно невозможно и требуется проведение соответствующей валидированной математической обработки полученных данных.
АППАРАТУРА
Спектрофотометры, предназначенные для получения спектров в ближнем ИК-диапазоне, состоят из:
- фильтра, дифракционной решётки или интерферометра, способных обеспечить целый диапазон электромагнитного излучения в области приблизительно от 780 нм до 2500 нм (12821 см-1 до 4000 см-1),
- устройств сбора и измерения интенсивности прошедшего или отражённого излучения (пропускание или отражение), таких как интегрирующая сфера, оптоволоконный датчик и т.д., соединённых с соответствующим детектором,
- устройств математической обработки полученных спектральных данных. ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦА
Для измерения пропускания. Данный способ обычно используется в случае разбавленных или неразбавленных жидкостей, а также твёрдых веществ, находящихся в растворе.
Пробы исследуют в кювете с подходящей длиной оптического пути (обычно от 0,5 мм до 4 мм), прозрачной для излучения ближнего ИК-диапазона либо погружают в них оптоволоконный датчик подходящей конфигурации, которая создаёт спектр в области пропускания совместимой со спецификациями прибора и соответствующей предполагаемой цели.
При получении спектров жидкой пробы в ближнем ИК-диапазоне должны приниматься во внимание возможность зависящих от температуры отклонений спектров или любых других эффектов, оказывающих влияние на спектры.
Во всех случаях способом, соответствующим оптической конфигурации прибора, должны быть внесены поправки, учитывающие влияние фона, например, из спектра исследуемой пробы может быть вычтен спектр сравнения воздуха (для жидкостей) или растворителя (для растворов).
